Scipioni 等(1997)的工作表明在 24 小時內採血量達到大鼠總血量的 40% 且 2 周後重復,大體上看不出會有不良影響。 總之,關於動物採血後健康狀況 的關鍵性指標如心率、呼吸、激素水平及行爲學改變的數據不多,而這些指標 或許會在採血時發生變化以適應過度的採血。 但要在採血時研究這些指標的變 化將需要付出極大的人力和物力。
血液必須在採血時或採血後立即與抗凝血劑充分混合。 採血時與抗凝劑混合方法:用於血液收集的無菌1mL注射器可以將1mL抗凝血劑從小瓶吸入注射器,然後將全部抗凝血劑重新注回小瓶,即在採血前用抗凝血劑“灌注”採血的注射器。 在已有采血後樣本的1.5mL離心管中加入不超過150μL的抗凝劑。 在相對離心力14000g下離心血樣10-15分。 用移液管吸取分離的血漿,並轉移到乾淨的離心管中。
小鼠心臟採血: 小鼠灌胃具體操作
若在血管痙攣時強行抽吸,會導致管壁變形,針頭易刺破管壁形成血腫。 常用於少量血液採集,隱靜脈採血無需麻醉,待動物固定後剃毛暴露採血點,採血針刺入採血點,即可獲得血液樣本。 採血結束後使用無菌幹棉球壓迫止血。 實驗動物中最主要的模式動物小鼠,在科研和應用性研究中大量使用,動物實驗中,給予動物受試物後,我們除了觀察其外觀和表徵,可能還需要採集動物的血液或體液等進行檢測,以便進一步觀察動物的生理、生化指標的變化。 將小鼠麻醉後,平躺放置在實驗檯面上,中指、食指固定小鼠尾部,用刀片輕劃小鼠尾側靜脈或尾正中動脈,待血液流出後,用移液槍吸取血液。
右手持採血管,將尖端與小鼠面部成45℃的夾角,沿內眥插入內眼角,滑入眼球后方,輕輕向眼底方向刺入,當感到有阻力時即旋轉採血管以切開靜脈叢,血液即流入採血管中。 採血結束後,拔出採血管,放鬆左手,使用無菌紗布塊輕輕壓迫眼眶幫助止血。 藉由痛苦表情表可提供研究人員更準確監測動物行為及表徵,熟悉動物的身體狀態,促使實驗操作過程更加順利。
小鼠心臟採血: 小鼠採血(剪尾採血、摘除眼球採血、心臟採血
如有想更進一步瞭解詳細的內容,可點擊 (圖4) 動物痛苦表情評分表 進入觀看。 基本方法同齧齒類動物的心臟採血。 因豬的胸部肌肉較厚,應使用心臟穿刺針。 左手探摸,在左3~4肋間處,右手持連有心臟穿刺針的注射器。
血液總量取決於物種、性別、年齡、健康及營養狀況。 對於同一種物種,較 大動物單位體重的總血量比較小的動物要少,老齡和肥胖動物單位體重含總血量 少於年輕和正常體重的動物。 一般情況下,總循環血量爲55~77 ml/kg 體重。 對動物的終末和非終末採血技術(如麻醉,取血體積)是有區別的,終末採血指的是以動物死亡爲實驗結束時採血與在清醒動物身上單次或多次採血的情況是迥然不同的。 (五) 尚有其他物種的採血方式說明,如狗、鼬、天竺鼠、倉鼠及猴子等,如有想更進一步瞭解詳細的內容說明,可點擊 (圖1) 各物種採血方式的資訊 進入觀看。
小鼠心臟採血: 大鼠、小鼠心臟取血實驗
小鼠每次可取血0.1ml左右,大鼠每次可取血0.3~0.5ml。 若只需要幾微升血量,可用銳器(刀或剪刀)垂直割去尾尖1-2 mm,用毛細吸管吸取血液。 使用肝素處理過的毛細吸管,或將小鼠尾部放入肝素處理過的離心管內,可增加取血量。 小鼠心臟採血 特定專題提供止痛的方法及使用的時間點、動物麻醉所需的麻醉深度和持續時間及麻醉方法、大小鼠保定方法、人道終止時機點、動物福利評估等。
- 在對營養狀況良好的小鼠進行採血時,單次採血量最多可以到達循環血量的10%,這是避免出現不良反應的最大值。
- 用左手觸摸左側第3~4肋間,選擇心搏處穿刺(胸骨左緣外3mm處),進針後針頭偏向胸骨,與水平面呈45°夾角,或沿劍突尾端緣和腹面平面呈30°角向頭端刺入。
- 取血後用棉球壓迫止血並用 6%液體火棉膠塗在傷口處止血。
- 將動物側臥固定,減去採血部位的被毛,用碘酒、酒精消毒皮膚,用膠皮帶紮緊或用手抓緊靜脈近心端,使血管擴張,使用6號或7號針頭的注射器從靜脈遠心端水平刺入血管,抽取時速度要稍慢,以防抽癟血管。
- 在相對離心力14000g下離心血樣10-15分。
- 動物安樂死的目的是以人道的方式使動物死亡,使動物在最低程度的疼痛、緊迫,並在最短的時間內失去知覺和痛覺。
注意抽吸速度不要太快,因豬耳皮膚較厚,應選擇銳利的針頭。 另外,可用刀片切開靜脈,用滴管等物吸取。 小鼠心臟採血 固定兔後,一手固定兔耳,一手持注射器,在中央動脈末端,沿動脈平行的方向刺入動脈,刺入方向應朝向近心端。
小鼠心臟採血: 動物採血指南
在一些特殊的實驗中,如進行尾靜脈注射時,可使用特殊的固定裝置進行固定,如尾靜脈注射架或粗的玻璃試管。 單次採血不超過動物總血量的15%時,可在3~4周後重復採血。 長期多次採 血每24h不應超過總血量的1%(0.6 ml/kg/d)。 採集次數和(或)採血量過多則引 起貧血。 (一) 替代 (Replacement):是指直接替換或避免在其他情況下使用的實驗中使用動物的技術或方法。
小鼠心臟採血: 動物實驗中,動物採血應該怎麼做?
在實驗過程中減少動物的疼痛不安和獲得預期實驗結果一樣重要。 這不僅是 出於人道主義,而且也是良好科學實踐所要求的內容。 所以如果不能完全排 除應激,那麼也應將應激降至最小程度。 這不只是爲動物考慮,也是爲獲得良好 的科學數據。
小鼠心臟採血: 小鼠割(剪)尾採血法
然而,血液學參數是很容易測定的。 當採血量接近最大限值時,實驗動物的權益問題是首先應考慮的問題,但 動物生理反應對研究結果的影響必須同時加以考慮。 因爲它可能會影響數據的 分析和數據的正確性。 採樣前動物的臨牀症狀,也是決定採血量的前提。 非終末採血可分爲單次和多次採血,單次採血量低於動物總血量的15%對動 物不會有明顯影響。
小鼠心臟採血: 小鼠皮下注射、皮內注射、肌肉注射和靜脈注射
若不需保留動物存活時,也可麻醉後切開動物胸部,將注射器直接刺入心臟抽吸血液。 操作時,先將動物深度麻醉,然後將其固定在鼠板上,剖開胸腔,然後將注射器針頭刺入右心室後立即抽血。 將動物麻醉後,取側臥位放在一平面上,用食指和拇指壓迫頸部兩端使頭部靜脈血液迴流困難,眼球突出。 通常用硬質毛細玻璃管或巴斯德玻璃吸管,與鼠面部呈45°夾角,由眼內角刺入眼瞼和眼球之間,向眼底部方向移動,稍加旋轉以切開靜脈叢。 小鼠心臟採血 一般刺入深度爲小鼠約2~3mm、大鼠約4~5mm,刺入出血後,將取血管邊推邊抽。
小鼠心臟採血: 小鼠解剖取材
毒理實驗中血液學指標的變化非常重要,多次 採血會對這些指標發生影響,應特別注意多次採血後的恢復時間然而,藥動學研究時大量採血(如 20%)會引起血液動力學變化,或許會對半衰期等參數產生影響。 如果在24小時內處死動物,可以評價消除半衰期。 孰悉評估實驗動物的整體狀態,不管是生理或心理的,對於研究人員都是必要的課題。 而動物實驗對於人類醫學上的貢獻是非常重要的,因此研究人員於進行實驗前,必須具備專業資格及技術訓練、建立評估動物福祉的機制及強化實驗動物倫理觀念。
小鼠心臟採血: 實驗動物筆記本
此法只能一次採血,如需反覆多次採血樣時,則不能採用這種方法。 識別與預防實驗動物的疼痛、苦痛、窘迫是執行實驗動物研究過程中的必要技能,必須減少較差的動物福祉,提升自我的實驗設計(運用人道終止、修改實驗的程序及提供適當的問題治療)。 小鼠心臟採血2025 其網站採用線上互動式教學說明,如需瞭解更詳細內容說明,請點擊 (圖3) 動物福利評估電子學習資源 進入觀看。 小鼠麻醉後,常規抓取小鼠,置於採血臺上,左手拇指及食指抓住鼠兩耳之間的皮膚使鼠固定,並輕輕壓迫頸部兩側,阻礙靜脈迴流,使眼球充分外突,提示眼眶後靜脈叢充血。
小鼠心臟採血: 小鼠實驗室操作之花式採血
適當增加內壓看有無回血,若有回血則緩慢抽取所需血量,棉籤按壓止血。 手拇指和食指從背部抓住小鼠頸部皮膚,將小鼠頭朝下,小鼠保定後將其尾巴置於50°熱水中浸泡數分鐘,使尾部血管充盈。 擦乾尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1~2mm,用試管接流出的血液,同時自尾根部向尾尖按摩。 小鼠心臟採血2025 取血後用棉球壓迫止血並用 6%液體火棉膠塗在傷口處止血。
採血結束後,按壓傷口或使用止血劑(如硝酸銀)以止血,並將小鼠放回籠內。 小鼠心臟採血 將小鼠麻醉後用組織剪剖開腹部,分離出腹主動脈。 一手持一次性注射器,將針頭近乎平行(小於30°)刺入腹主動脈,另一手固定針頭,一手緩慢抽動注射器,抽取所需量血液。 小鼠心臟採血2025 取完血後,用棉球輕壓針眼處,快速拔出針頭。 大、小鼠可從股動(靜)脈、腋下動(靜)脈、頸動(靜)脈或腹主動脈採血。
小鼠心臟採血: 大鼠胚胎移植
每次採血量0.1ml,可在取血量較少時採用。 前後肢皮下千層靜脈主要包括:前肢內側皮下頭靜脈、後肢外側小隱靜脈。 將動物側臥固定,減去採血部位的被毛,用碘酒、酒精消毒皮膚,用膠皮帶紮緊或用手抓緊靜脈近心端,使血管擴張,使用6號或7號針頭的注射器從靜脈遠心端水平刺入血管,抽取時速度要稍慢,以防抽癟血管。 小鼠心臟採血 當針頭插入血管後,應解除靜脈上端加壓的手或膠皮管。 如只需較少血量,可直接用針尖穿刺,再用玻片接住或用滴管吸取。
小鼠心臟採血: 大鼠炎症法
用左手的食指,中指,無名指及大拇指將小鼠尾巴固定。 小鼠心臟採血2025 握住1ml 小鼠心臟採血 注射器前面0.1ml處。 右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指處斜15°角緩慢進針。
小鼠心臟採血: 小鼠行爲實驗
取到所需的血量後,即除去加於頸部的壓力,同時將採血器拔出。 小鼠心臟採血 小鼠心臟採血2025 爲防止術後穿刺孔出血,用消毒紗布壓迫眼球30秒。 若手法得當,體重20~30g的小鼠每次可採血0.2~0.3ml,體重200~300g的大鼠每次可採血0.4~0.6ml。 採血前將鼠尾部浸在50℃左右溫水中數分鐘或用大功率燈泡照射數分鐘,麻醉動物,使尾部血管充盈。 用75%酒精擦拭鼠尾,用鋒利的刀片在尾部作一橫切口,割破尾靜脈或動脈,讓血液自由滴入盛器或用毛細吸管吸取,採血結束,傷口消毒並壓迫止血。 若多次取血,最好從鼠尾末端開始。
小鼠心臟採血: 大鼠炎症法
抓取固定時既要小心仔細,不能粗暴,又要大膽敏捷。 小鼠性情較溫順,一般不會咬人,而且體重比較輕,比較容易抓取固定。 大多數生化分析最好的時間是收集後2小時內在室溫下進行分析。 如果血清或血漿樣品不能在收集後2小時內進行處理,可將樣品(放在加蓋的試管中)放入4℃冰箱中短期儲存(1周)或放入20℃或更冷的冰箱中長期儲存(1周至6個月)。
注意:長期多次採血每24h不應超過總血量的1%(0.6 小鼠心臟採血 mL/kg/d)。 小鼠心臟採血2025 採集次數和(或)採血量過多則引起貧血。 本網站所有註明“來源:丁香園”的文字、圖片和音視頻資料,版權均屬於丁香園所有,非經授權,任何媒體、網站或個人不得轉載,授權轉載時須註明“來源:丁香園”。 本網所有轉載文章系出於傳遞更多信息之目的,且明確註明來源和作者,不希望被轉載的媒體或個人可與我們聯繫,我們將立即進行刪除處理。
如需瞭解更詳細內容,請點擊 (圖5) 小鼠心臟採血 實驗設計資訊 進入觀看。 小鼠心臟採血2025 將動物固定後,用酒精、碘酒消毒。 用力擦拭豬耳,可清晰見到耳緣靜脈,用連有6號針頭的注射器直接抽取。
小鼠心臟採血: 小鼠行爲實驗
採血是動物實驗中經常應用的樣本採集方法之一。 小鼠採血方法種類多樣,包括但不限於腹主動脈採血、眼眶靜脈叢取血、摘眼採血、剪尾採血、心臟採血、斷頭採血、頸動靜脈採血和股動靜脈採血等方法。 對大、小鼠如採血量不超過0.1 ml 時,常用尾尖採血法。